ELISA實驗操作視頻

2022-04-26

Westernblot實驗蛋白提取

貼壁細胞總蛋白提?。? 用TBS緩沖液潤洗貼壁細胞2-3次，最后一次盡量吸干殘留液。加入適當體積的細胞總蛋白提取試劑(使用前數分鐘內加入蛋白酶抑制劑)于培養板/瓶內裂解3-5min。期間反復晃動培養板/瓶，使試劑與細胞充分接觸。用細胞刮刀將細胞及試劑刮下，收集到1.5mL離心管中。冰浴30min，期間用移液器反復吹打，確保細胞完全裂解。4℃13000g離心5min，收集上清，即為總蛋白溶液。 懸浮細胞總蛋白提?。? 低速離心收集細胞，加入適當體積的冷卻的PBS緩沖液重懸，2000rpm離心10min，吸除上清。重復以上操作兩次，收集細胞沉淀。加入適當體積的細胞總蛋白提取試劑(使用

2021-08-14

引物干粉使用說明

(1)引物干粉開蓋前13000rpm，室溫離心1min。 (2)加入管壁上10倍nmole數值的水(μL)的DEPC水，渦旋混勻，瞬時離心。此為引物儲備液(100μM)，用后于-20℃保存。 *引物管上一般是3.0~6.0nmole，加入十倍這個數值微升的水(30~60μL)。 (3)取一新1.5mL EP管，加入380μLDEPC水，上下游引物儲備液各吸取10μL于新EP管中，渦旋混勻，瞬時離心。此為引物工作液(2.5μM)，可直接用于實驗，用后于4℃保存。

2021-08-14